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本來ELISA試劑盒的原理及辦法是較為簡(jiǎn)略的,有關(guān)ELISA操作的材料,網(wǎng)上一大堆,可是真正到自個(gè)上手的時(shí)分仍是會(huì)犯模糊。今日咱們就來細(xì)心說說這方面的疑問,我司技能解析:試驗(yàn)菜鳥怎么靈活運(yùn)用ELISA試劑盒?
1.關(guān)于一些小分子的查看,通常來說,要用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA去查看,也要采購選用這個(gè)辦法的盒子。通常細(xì)胞因子的查看,都是選用常規(guī)的夾心法ELISA查看,由于因子分子量比較大,通常10幾個(gè)KD擺布,很簡(jiǎn)略找到兩個(gè)或許多個(gè)抗原表位。
而小分子很難找到兩個(gè)不一樣的表位,也就決定了包被抗體和查看抗體無法一起小分子并固相化。解決方案即是酶標(biāo)板上包被二抗,每個(gè)孔參加一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶符號(hào)的查看抗體,顯色底物。樣品的意圖小分子的含量越高,吸光度越低。
2.還有一個(gè)疑問,這是不是客戶的誤區(qū),即是拿來一個(gè)目標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去查看。ELISA查看辦法簡(jiǎn)略,靈敏度高,可是該查看活性的查看活性,該做western的做western。
特別闡明
① ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)有96T和48T兩種,翻開包裝后要及時(shí)查看一切物品是不是*完好。
② 一星期內(nèi)運(yùn)用可存于4℃,需長時(shí)間寄存或?qū)掖芜\(yùn)用主張存于-20℃。
操作提醒:
① 將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),防止槍頭和孔內(nèi)液體觸摸,可使槍頭上的液滴和孔壁觸摸,液滴會(huì)天然流下去。
② 液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
③ 溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸騰。
④ 洗液不行時(shí),可用蒸餾水自行制造PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,參加0.1%的吐溫6作為洗液。參加1/1000的疊氮鈉后可長時(shí)間保留。
⑤ ELISA試劑盒洗板時(shí),每次洗液參加后,應(yīng)靜置1分鐘,使清潔愈加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。