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絕大多數(shù)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問題,莫過于試驗(yàn)成果不抱負(fù)。其實(shí)做科研試驗(yàn),就是這樣在不斷探究中尋求真理。很難有人可以的試驗(yàn)成功。一旦出現(xiàn)“花板",實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須放棄,重新進(jìn)行,不僅浪費(fèi)物料和時(shí)間,而且還會(huì)出現(xiàn)樣本量缺少、交叉污染、報(bào)告延遲等一系列問題。
影響因素分析如下:
一、標(biāo)本因素
正確處理標(biāo)本,防止大規(guī)模溶血、血漿層異物、使用一次性加樣槍頭,防止交叉污染。血清和血漿均可以用于檢測(cè),但血清的分離應(yīng)在抽血后等血液凝固后再離心。
二、試劑因素
正確保存及使用有效試劑。使用過期試劑及底物接觸金屬容器、底物混合后放置時(shí)間較長(zhǎng)均影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。選擇試劑時(shí)應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好,批間差小的試劑。不同廠家的試劑不能混用,包括底物和洗滌液。檢測(cè)前應(yīng)將試劑放置室溫平衡半小時(shí),洗滌液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,同時(shí)觀察濃縮洗滌液中有無結(jié)晶,若有結(jié)晶應(yīng)放37℃水浴中融化后才可使用。
三、技術(shù)人員操作因素
嚴(yán)格按照相關(guān)實(shí)驗(yàn)SOP操作實(shí)驗(yàn)。加樣時(shí)應(yīng)盡可能的垂直加樣,并加在包被孔的底部(注:勿應(yīng)用力過度破壞底部包被物質(zhì)),不可加在孔的上部及外部。
四、洗板機(jī)的因素
ELISA試劑盒廢液瓶裝滿后應(yīng)及時(shí)清空,以防止廢液回流對(duì)管道的污染,而使洗滌不,造成“花板"。洗板結(jié)束后應(yīng)用蒸餾水清洗管道,以防止廢液在管道中的殘留。同時(shí)應(yīng)根據(jù)儀器維護(hù)保養(yǎng)程序,定期對(duì)洗板機(jī)進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)。
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